Ægceller produceret fra stamceller isoleret fra humane æggestokke


Ægceller produceret fra stamceller isoleret fra humane æggestokke

Amerikanske forskere har formået at isolere stamceller fra æggestokkene i kvinder med reproduktiv alder og brugte dem til at lave ægceller, der ser ud til at opføre sig normalt. Opdagelsen, offentliggjort online i Naturmedicin I weekenden bekræfter resultaterne af tidligere undersøgelser, der tyder på, at kvinder fortsat producerer nye æg i voksenalderen og vælter den traditionelt holdte opfattelse, at de er født med et begrænset antal æg, der gradvist nedbryder i deres reproduktionsår. Håbet er, at undersøgelsen vil føre til nye måder at hjælpe infertile kvinder med.

Studerende Dr. Jonathan Tilly, direktør for Vincent Center for Reproduktiv Biologi, og forskningschef i Vincent Department of Obstetrics and Gynecology på Massachusetts General Hospital (MGH) i Boston, fortalte pressen, som de føler deres undersøgelse tydeligt viser, at under hende Reproduktiv liv, en kvindes æggestokke indeholder stamceller, der er i stand til at lave nye æg.

"Opdagelsen af ​​oocytprecursorceller i voksne humane æggestokke kombineret med, at disse celler deler de samme karakteristiske træk ved deres musemodeller, der producerer fuldt funktionelle æg, åbner døren for udvikling af hidtil usete teknologier til at overvinde infertilitet hos kvinder og måske endda Forsinke timingen for ovariesvigt, "sagde Tilly, der også er professor i obstetrik, gynækologi og reproduktiv biologi på Harvard Medical School.

I 2004 Natur Udgivet en milepælmusestudie, også fra Tilly og hans hold, der udfordrede den traditionelle opfattelse, der havde eksisteret i omkring et halvt århundrede, at kvindelige pattedyr er født med en begrænset mængde æg, der er opbrugt i deres reproduktionsår, indtil der Er der ingen tilbage i overgangsalderen.

Et andet opfølgende studie offentliggjort i Celle Et år senere viste knoglemarv eller blodcelletransplantationer genoprettet ægcelleproduktion hos voksne mus, hvis frugtbarhed var blevet ødelagt med kemoterapi.

De to undersøgelser har åbnet døren for kontroversielle alternative opfattelser og blev efterfølgende styrket af yderligere resultater fra MGH og andre hold rundt om i verden.

For eksempel, i 2007 i Journal of Clinical Oncology , Rapporterede MGH-teamet, hvordan kvindelige mus, der modtog knoglemarvstransplantationer, efter at deres æg var blevet ødelagt med kemoterapi, blev gravid og fødte hvalpe, der bar deres moderers gener og ikke knoglemarvgiverne.

Og en 2009 Naturcellebiologi Papir, rapporterede, hvordan et team på Kinas Shanghai Jiao Tong University, isolerede ægproducerende stamceller (oocytproducerende stamceller eller OSC'er) fra voksne mus, transplanterede dem til hunmus, hvis æg var blevet ødelagt med kemoterapi og derefter viste, hvordan Stamceller producerede nye modne oocytter, der fik nye æg i stand til at blive befrugtet og udvikle sig til sunde hvalpe.

Uafhængig bekræftelse på, at voksne muss æggestokke indeholder OSC'er, kom i et andet papir, der blev offentliggjort i Differentiering I 2010.

Men Tilly er den første til at påpege, at disse undersøgelser havde betydelige begrænsninger, selv om de uden tvivl viste, at OSC-celler eksisterer i æggestokkene hos voksne kvindelige pattedyr.

Disse begrænsninger stillede fortsat spørgsmålet for dem, der stadig havde tvivl om, om OSC-poolen i voksne kunne fornyes.

En af begrænsningerne er, hvad Tilly beskriver som den "relativt rå tilgang", der bruges til at isolere OSC'er i 2009-undersøgelsen fra Kina, en metode, der "ofte resulterer i forurening af ønskede celler af andre celletyper".

Med denne seneste undersøgelse behandlede Tilly og hans team denne begrænsning ved at udvikle og validere en mere præcis måde at sortere celler på for at isolere OSC'er uden forurening fra andre celletyper.

En måde forskere isolerer celler fra væv, der indeholder mange celletyper, er at finde et "markør" -protein, der udtrykkes unikt af målcellerne og ikke af andre celler. Hvis det samme protein findes på overfladen af ​​andre celletyper, er der en risiko for, at disse andre uønskede typer vil blive isoleret sammen med de ønskede.

De kinesiske forskere i 2009 Naturcellebiologi Undersøgelse havde brugt en protokol, der påberåbte udtrykket af et markørprotein kaldet Ddx4 eller Mvh. Men dette var tidligere kun fundet i cytoplasma (det indre materiale) af oocytter. Dette modsatte tidligere undersøgelser, som kun havde set på overfladeproteinerede proteiner.

Men ved at anvende "state-of-the-art fluorescensaktiverede cellesorteringsteknikker" bekræftede MGH-teamet, at mens Ddx4 faktisk eksisterede inden for oocytter, eksisterede den også på overfladen af ​​en særlig sjælden og specifik gruppe af æggestokke celler, som de Kunne også identificere ved hjælp af forskellige andre genetiske markører og tests for at bekræfte, at de var OSC'er.

I en af ​​bekræftelsestestene tog de grønne fluorescerende protein (GFP) -mærkede mus-OSC'er og injicerede dem i æggestokkene fra normale voksne hunmus.

Flere måneder senere, da de undersøgte ovariefolliklerne hos de injicerede mus, fandt de to typer oocytter: nogle med det mærkede protein og nogle uden.

De fandt også fluorescerende mærket og umærket oocytter i grupper af celler, som de spolede ud af musens ovidukter, efter at de var blevet induceret til ægløsning.

Og i et yderligere skridt tog forskerne fluorescerende mærkefulde oocytter ud, befrugte dem i et "testrør" og viste, at de producerede embryoner, der udviklede sig til eksplosionsblastocyststadiet, et punkt, der normalt plejede at vise normal udvikling.

Med denne tilgang viste MGH-holdet, at det ikke var nødvendigt at beskadige musens æggestokke med giftig kemoterapi før indsættelse af de nye OSC'er.

Efter at deres eksperimenter viste, at det var levedygtigt hos mus, forsøgte Tilly og kolleger deres nye sorteringsteknik til at isolere OSC'er fra humane æggestokke.

Ikke alene har de menneskelige ægceller, der er gjort på denne måde, deler de samme genetiske og vækstegenskaber, der ses med musens æg, og de lignede menneskelige oocytter og havde de samme genekspression mønstre, nogle af dem havde kun halvdelen af ​​det genetiske materiale, du finder i Andre celler i kroppen. Dette viste, at ægcellerne havde gået igennem meioser, celledelen normalt set i modne æg og sæd, når de forbereder befrugtning (når halvdelen af ​​det genetiske materiale fra moderen er forbundet med halvdelen af ​​det genetiske materiale fra faren til at gøre Et komplet sæt genetisk materiale).

Undersøgelsen beskriver et afsluttende eksperiment med de menneskelige æg, hvor Tilly og kollegaerne tog biopsieret humant ovarievæv, injicerede det med mærkede humane OSC'er og podede det lige under huden af ​​immundefekte mus (så de ville ikke afvise det fremmede væv ).

Da de undersøgte graftene en til to uger senere, fandt de menneskelige follikler med mærkede oocytter (disse kunne have været til stede, da vævet blev podet) og også umærkede oocytter, som skal være kommet fra de injicerede humane OSC'er.

Tilly sagde, at disse eksperimenter var "pivotal proof-of-concept", at menneskelige OSC'er genintroduceret til voksent humant æggestokkvæv udførte deres forventede funktion ved at generere nye oocytter, der bliver omsluttet af værtsceller til dannelse af nye follikler ".

"" Disse resultater er præcis, hvad vi ser, hvis vi udfører de samme eksperimenter ved hjælp af GFP-udtrykkende mus-OSC'er, og GFP-udtrykkende mus-oocytter dannet på den måde udvikler sig til fuldt funktionelle æg, "tilføjede han.

Han påpegede, at denne seneste undersøgelse giver tre "vigtige beviser", som de begrebsmæssige af deres tidligere arbejde har bedt om.

Først udviklede de og "omfattende valideret" en protokol til at sortere og pålideligt rense OSC'er fra æggestokkene af voksne pattedyr. Dette viste sig, at cellerne eksisterer.

For det andet testede de ægcellernes funktion disse oocytter produceret i mus, og fortsatte med at vise, at de kan befrugtes og føre til sunde embryoner.

Og for det tredje identificerede og karakteriserede de ækvivalenten hos mennesker.

De konkluderer:

"Æggestokke af kvinder med reproduktiv alder, der ligner voksne mus, har således sjældne mitotisk aktive kimceller, der kan formeres in vitro såvel som generere oocytter In vitro og In vivo ."

Tilly og kollegaer undersøger nu flere af de mange mulige kliniske anvendelser af deres resultater. Disse omfatter: oprettelse af menneskelige OSC-banker, identifikation af hormoner, der kan fremskynde fremstillingen af ​​æg fra humane ægstamceller, udvikle modne humane æg i testrøret og andre måder at forbedre infertilitetsbehandlinger som IVF.

Book 03 - The Hunchback of Notre Dame Audiobook by Victor Hugo (Chs 1-2) (Video Medicinsk Og Professionel 2020).

Afsnit Spørgsmål På Medicin: Medicinsk praksis